Pracownia Mikroskopii Fluorescencyjnej i Konfokalnej
Zakład Anatomii i Neurobiologii
Wydział Lekarski
O NAS
Pracownia Mikroskopii Fluorescencyjnej i Konfokalnej powstała w ramach Programu „Inicjatywa Doskonałości – Uczelnia Badawcza” jako laboratorium core facility przy Zakładzie Anatomii i Neurobiologii. W pracę laboratorium zaangażowani są wybitni specjaliści w dziedzinie mikroskopii fluorescencyjnej oraz mikroskopii konfokalnej. Zespół badawczy Pracowni za cel obrał rozpowszechnienie zaawansowanego obrazowania mikroskopowego, a tym samym wsparcie pracowników i doktorantów w pogłębianiu wiedzy na temat technik mikroskopowych, poprzez umożliwienie dostępu do specjalistycznej aparatury.
NASZ POTENCJAŁ
1. System mikroskopii konfokalnej Zeiss LSM 880 z przystawką superrozdzielczą AiryScan współpracujący z mikroskopem Axio Imager.Z2 Zeiss, Niemcy
2. Skaner preparatów histologicznych Zeiss AxioScan.Z1 Zeiss, Niemcy
3. System do mikrodysekcji laserowej PALM Microbeam współpracujący z mikroskopem AxioObserver 7 Zeiss, Niemcy
4. Mikroskop monoskopowy Olympus MVX 10 Olympus, Japonia
5. Mikroskop Nikon Eclipse E600 z kamerą Nikon DS-Ri2 Nikon, Japonia
ZAKRES USŁUG
System Mikroskopii Konfokalnej pozwala na analizę wybarwionych metodami histochemicznymi i immunohistochemicznymi skrawków mrożeniowych lub utrwalonych hodowli komórkowych umożliwiając obrazowanie w polu jasnym z wykorzystaniem kontrastu Nomarskiego (DIC). Mikroskop wyposażony jest w dwie kamery, jedną umożliwiają aktywizację obrazów w trybie monochromatycznym, a druga do obrazowanie barwne, pozwalające na rejestrację sygnału fluorescencencyjnego.
Dzięki Systemowi Mikroskopii Konfokalnej możliwe są:
– analiza czynności i struktury komórek normalnych i patologicznych na poziomie organelli komórkowych za pomocą techniki obrazowania poprzez rejestrację zmian właściwości optycznych
– analiza różnego rodzaju próbek, dokonywanie ich rekonstrukcji oraz obrazowania przestrzennego
– prześledzenie dynamiki procesów zwyrodnieniowych i regeneracyjnych ośrodkowego układu nerwowego (OUN)
Skaner preparatów histologicznych umożliwia otrzymanie wysokorozdzielczych obrazów preparatów oraz pozwala na ich zapis w postaci wirtualnych skanów.
System do mikrodysekcji laserowej PALM Microbeam za pomocą wiązki lasera wycina wybrany obszar preparatu, który następnie można poddać prosesom izolacji DN, RNA czy też białek. Aparatura ta pozwala na prowadzenie analiz na materiałach mrożeniowych, utrwalonych a także preparatach parafinowych. System pozwala również na izolację komórek macierzystych bez ingerencji w ich strukturę genetyczną.
Ponadto Pracownia oferuje:
– ocenę morfologiczną materiału biologicznego opierająca się na metodach mikroskopii świetlnej, fluorescencyjnej i konfokalnej
– ocenę jakościowa preparatów znakowanych metodami histochemicznymi i immunocytochemicznymi w barwieniach pojedynczych oraz wielokrotnych, ze szczególnym uwzględnieniem lokalizacji komórkowej badanych związków
– mapowanie badanych związków w obrębie badanych struktur poprzez analizę wybarwionych metodami histochemicznymi i immunochemicznymi w barwieniach zarówno pojedynczych jak i wielokrotnych skrawków seryjnych
– analizę ilościową wybranych parametrów morfologicznych metodami mikroskopii konfokalnej
– mikrodysekcję laserową fragmentów preparatów mrożonych, parafinowych, pojedynczych komórek oraz ich fragmentów
– wycinanie tkanek świeżych i utrwalonych prosto ze szkiełka podstawowego
– przygotowanie raportu na podstawie uzyskanych zdjęć materiału oraz opracowanych wyników.
ZESPÓŁ BADAWCZY
W skład zespołu badawczego wchodzą:
- dr hab. Przemysław Kowiański, prof. uczelni
- dr hab. Beata Ludkiewicz
- dr hab. Sławomir Wójcik
- dr Aleksandra Rutkowska
- dr Jan Henryk Spodnik
- dr Grażyna Lietzau
- mgr Ewelina Czuba-Pakuła
- mgr Adriana Pszczolińska
- mgr Natalia Melka
PUBLIKACJE
Na podstawie wyników badań uzyskanych dzięki wykorzystaniu wiedzy, doświadczenia naukowców z Pracowni oraz posiadanej aparaturze powstało wiele publikacji, m.in.
1. Steliga A, Lietzau G, Wójcik S, Kowiański P. Transient cerebral ischemia induces the neuroglial proliferative activity and the potential to redirect neuroglial differentiation. J Chem Neuroanat. 2022 Nov 17;127:102192. doi: 10.1016/j.jchemneu.2022.102192
2. Piekarska K, Urban-Wójciuk Z, Kurkowiak M, Pelikant-Małecka I, Schumacher A, Sakowska J, Spodnik J, Arcimowicz Ł, Zielińska H, Tymoniuk B, Renkielska A, Siebert J, Słomińska E, Trzonkowski P, Hupp T, Marek-Trzonkowska N. Mesenchymal stem cells transfer mitochondria to allogeneic Tregs in an HLA-dependent manner improving their immunosuppressive activity. Nat. Commun. 2022 : vol. 13, art. ID 856, s. 1-20
3. Velasco-Estevez M, Koch N, Klejbor I, Caratis F, Rutkowska A. Mechanoreceptor Piezo1 is downregulated in multiple sclerosis brain and is involved in the maturation and migration of oligodendrocytes in vitro. Front. Cell. Neurosci. 2022 : vol. 16, art. ID 914985, s. 1-9
4. Velasco-Estevez M, Koch N, Klejbor I, Laurent S, Dev Kumlesh K., Szutowicz A, Sailer A.W., Rutkowska A. EBI2 is temporarily upregulated in MO3.13 oligodendrocytes during maturation and regulates remyelination in the organotypic cerebellar slice model. Int. J. Mol. Sci. 2021 : vol. 22, nr 9, art. ID 4342, s. 1-15
5. A. Ebertowska, B.Ludkiewicz, N. Melka, I. Klejbor J. Moryś. The influence of early postnatal chronic mild stress stimulation on the activation of amygdala in adult rat J Chem Neuroanat 2020;104:10174
6. Nicotine-induced CREB and DeltaFosB activity is modified by caffeine in the brain reward system of the rat. Kowiański P, Lietzau G, Steliga A, Czuba E, Ludkiewicz B, Waśkow M, Spodnik JH, Moryś J. J Chem Neuroanat. 2018 Mar;88:1-12. doi: 10.1016/j.jchemneu.2017.10.005. Epub 2017 Nov 1
7. J Sidor-Kaczmarek, M Cichorek, JH Spodnik, S Wójcik, J Moryś. Proteasome inhibitors against amelanotic melanoma. Cell Biol Toxicol. 2017; 33(6): 557–573. Published online 2017 Mar 9. doi: 10.1007/s10565-017-9390-0
8. S. Wójcik, JH Spodnik, J Dziewiątkowski, E Spodnik, J Moryś. Morphological Changes within the Rat Lateral Ventricle after the Administration of Proteasome Inhibitors. PLoS One. 2015; 10(10): e0140536. Published online 2015 Oct 19. doi: 10.1371/journal.pone.0140536
9. Wójcik, S., Spodnik, J.H., Spodnik, E., Dziewiątkowski, J., Moryś, J. Nigrostriatal pathway degeneration in rats after intraperitoneal administration of proteasome inhibitor MG-132. 2014. Folia Neuropathologica 52(1):41-55. DOI: 10.5114/fn.2014.41743
10. Steliga A, Waśkow M, Karwacki Z, Wójcik S, Lietzau G, Klejbor I, Kowianski P. Transcription factor Pax6 is expressed by astroglia after transient brain ischemia in the rat model. Folia Neuropathol. 2013;51(3):203-13. doi:10.5114/fn.2013.37704. PMID: 24114637
CENNIK
Pracownia będzie wykonywać analizy zgodnie z indywidualnymi zleceniami z dostosowaniem do konkretnych potrzeb kontrahentów. Koszt usługi wyceniany jest indywidualnie dla klientów zewnętrznych.
KONTAKT
dr hab. med. Sławomir Wójcik
Pracownia Mikroskopii Fluorescencyjnej i Konfokalnej
Zakład Anatomii i Neurobiologii
Gdański Uniwersytet Medyczny
ul. Dębinki 1
80-211 Gdańsk
Numer telefonu 58 349 14 02
Mail slawomir.wojcik@gumed.edu.pl
fot. Paweł Sudara/GUMed